随着生物制药行业对分离纯化技术要求日益提高,高效层析介质的选型成为工艺开发的关键环节。Geldex® PG系列作为百林科层析填料里经典的凝胶过滤层析介质,凭借其独特的高交联度琼脂糖结构和优异的分离性能,成为工业规模纯化的首选凝胶过滤层析介质。
作为Geldex® PG系列的核心产品之一,Geldex® 200 PG凭借其10–600 kDa的宽分离范围和出色的批次间一致性,在单克隆抗体(mAb)、病毒载体和重组蛋白的纯化中发挥着重要作用。
技术参数
优异的分离性能
分子筛的核心价值在于其分离性能的卓越表现。作为生物大分子纯化的关键工具,Geldex® 200 PG凭借其高分辨率、宽动态分离范围(10-600kDa)和优异的峰对称性,在复杂样品的分离纯化中展现出无可比拟的优势。图1 为Geldex® 200 pg 16/600预装柱的柱效图谱;图2展示了Geldex® 200 PG能够在17000~440000的分子量范围内出色地分离这5种蛋白质。
图1.Geldex® 200 PG 16/600预装柱柱效图
层析柱:Geldex® 200 PG 16/600预装柱
样品:
肌红蛋白, 5.4 mg/mL, Mr 17 000
卵清蛋白, 36 mg/mL, Mr 44 000
HSA, 36 mg/mL, Mr 66 000
IgG, 2.8 mg/mL, Mr 158 000
马脾铁蛋白, 3.4 mg/mL, Mr 440 000
流速:1mL/min (30 cm/h)
缓冲液:10mM PB, 140mM NaCl, 2.7mM KCl, pH 7.4 (PBS)
图2 Geldex® 200 PG对标准蛋白的选择性比较
良好的机械性能
Geldex® 200 PG填料的卓越机械性能是其工业级应用的坚实保障。作为高性能层析介质,该填料展现出出色的刚性结构和优异的耐压稳定,在长期循环使用过程中仍能维持稳定的分离效率和分辨率。这种机械强度与分离性能的平衡,使Geldex® 200 PG成为生物制药企业实现稳定、高效、可放大纯化工艺的首选凝胶过滤填料解决方案。
图3和图4展现了Geldex® 200 PG的挑战压力情况,0.5MPa和1MPa压力条件下外观未有破碎微球,且粒径均一。
图3.Geldex® 200 PG 0.5MPa压力下镜检图
图4.Geldex® 200 PG 1.0MPa压力下镜检图
应用分享—单抗纯化IgG
填料:Geldex® 200 PG
层析柱:Chrom-LinX® 16/1000 (H=95 cm)
样品:IgG1 (500 μL)
流速:1mL/min (30 cm/h)
缓冲液:20 mM His-HCl, 50mM NaCl, pH 5.5
图5.Geldex® 200 PG纯化IgG
应用分享—去除聚体 图6纯化结果显示,使用Geldex® 200 PG可以有效纯化目的蛋白(150KDa),去除聚体等杂质。 层析柱:Geldex® 200 PG 16/600预装柱 样品:目的蛋白 (150KDa, 上样2 ml) 流速:1mL/min (30 cm/h) 缓冲液:20mM PB, 50mM NaCl, pH7.0
图6.Geldex® 200 PG纯化目的蛋白
预装柱 传统散装填料虽能满足基本需求,但在实际开发应用中,时间效率往往占据优先考虑范围,因此预装柱的推出,极大提高了工艺开发的效率。Geldex® 200 PG预装柱是将层析介质装填在Chrom-LinX® 实验室级别层析空柱中,其内径分别为16 mm 和26 mm,柱床高度为60 cm,可以满足大多数客户端样品的快速制备纯化。每一根预装柱都经过柱效检测,重现性好,操作简便,可轻松连接至层析设备。
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