随着制药行业的不断发展,上游工艺的不断优化,下游纯化面临着蛋白杂质含量增多,蛋白表达量突增的压力。基于此,百林科推出了明星产品MaXtar® S HC Pro阳离子层析介质,该产品凭借“宽”“锐”“稳”三大特征,在抗体与重组蛋白项目中发挥着重要作用。
优异的耐盐性能
MaXtar® S HC Pro 是一款强阳离子交换介质,作为MaXtar® S HC的升级款填料,同样兼具高载量与高分辨的特点,但MaXtar® S HC Pro 较MaXtar® S HC具有更广泛的操作范围,能为客户提供更多的工艺操作空间。
DOE实验设计:中心复合实验
因子:
pH范围:4.5/5.25/6.0
Cond范围:0/50/100 mM NaCl
响应:10%DBC载量
图1: MaXtar® S HC Pro 10%DBC等高线图
小结:DoE 结果表明,MaXtar® S HC Pro填料,在含有100 mM NaCl的上样条件下10%DBC最大仍有约100 mg/mL,含有盐溶液上样时,为了获得更高的载量,可适当降低上样pH值。
优异的杂质去除能力
MaXtar® S HC Pro填料,粒径为50 μm,多用于精细纯化步骤,不论是用于结合洗脱还是流穿模式都具有较好的分离能力,可有效降低产品来源的低分子杂质与高分子杂质。
测试条件:
样品:III胶原蛋白
层析柱:4.7mL预装柱,柱高10 cm
平衡缓冲液:80 mM HAc ,pH2.8
再生缓冲液:20 mM PB,1 M NaCl,pH8.0
图2:S HC Pro流穿模式层析图谱
表1:SEC-HPLC(%)检测结果
小结:结果显示,MaXtar® S HC Pro使用流穿模式,流穿蛋白90g/L的条件下,流穿液纯度达到99.39%的纯度,初始低分子杂由 19.623%降至0.1%,几乎全部去除 。该案例表现出MaXtar® S HC Pro优异的杂质去除能力。
工业放大的稳健性
MaXtar® S HC Pro,基架为MaXtar,即改良琼脂糖基架,具有高刚性,低反压的特点,在工业放大中具有更大的放大空间,MaXtar® S HC Pro已在实践中验证了放大的稳健性。
压力流速曲线(柱直径:300 mm):
图3:S HC Pro压力流速曲线
案例:
柱体积:40 L
柱高:14.1cm
柱直径:600 mm
图4:工艺流程压力表现
小结:由上图表明MaXtar® S HC Pro在工业化生产全过程中,全流程工艺压力≤1.2bar,表明填料反压较小,具有稳健的放大性能。
简而言之,MaXtar® S HC Pro优异的耐盐性,高分辨率以及放大操作空间大等特点,能为工艺开发提供更多的选择。百林科也希望,MaXtar® S HC Pro层析介质能帮助更多的客户达到其理想的纯化工艺目标。
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