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纯化小技巧 | 关于抗体滴度测定,聊聊ChromaX® A20


工艺筛选、参数优化、质量监控……每一个环节都离不开准确的IgG定量。面对复杂的细胞培养上清液,如何确保滴度测定又快又准?


百林科ChromaX® A20给出了答案。这款专为抗体浓度测定设计的Protein A亲和色谱分析柱,采用亲水性PS-DVB多孔微球与重组Protein A配基,结合特有表面处理技术,有效降低非特异性吸附,确保在复杂体系中也能精准捕获IgG,为后续工艺开发提供可靠数据。





产品特点

  • 亲水PS-DVB基材,具有刚性好,反压低,传质快的特性。

  • 独有的亲水处理技术,使非特异性吸附降至最低,确保抗体浓度测试结果的准确性。

  • Protein A 特异性结合IgG的Fc区域,高选择性保证浓度测定结果的准确。

  • 不锈钢柱体,可在HPLC上直接使用。

  • 快速高效,2~5min内即可完成一次分析。

  • 在抗体浓度0.02~10mg/ml的宽范围内具有良好的线性。

  • 采用耐碱Protein A配基,可以用0.1 M NaOH溶液对色谱柱进行再生。




适用场景覆盖

  • 抗体药物研发:细胞培养上清液的滴度快速测定,支持克隆筛选和工艺优化。

  • 填料载量评估:配合层析填料筛选,快速测定动态结合载量。

  • 兼容抗体类型:单抗、双抗、Fc融合蛋白等多种IgG类抗体。

  • 工艺开发与放大:各纯化步骤中间品的浓度监测,为工艺参数调整提供数据支持。




产品参数


表1.png

表1: 色谱柱规格


动态载量的测试条件:保留时间1min,当IgG的穿透量达到10%时,单位介质体积(mL)的IgG上样量(mg)。


应用案例见证实力


案例一:ChromaX® A20良好的线性关系


在抗体培养上清液较宽浓度范围内线性关系良好,高达0.9999。


测试条件

色谱柱:ChromaX® A20

流动相

  • BufferA: 20mM PB+150mM NaCl,pH 7.2

  • Buffer B: 0.1 M HAC+150mM NaCl,pH 3.0

样品:不同稀释浓度单抗细胞培养上清液

流速:2mL/min

进样体积:20µL

检测波长:280nm


图片1.png

图1:单抗细胞培养上清液标准曲线



案例二:ChromaX® A20 耐用性较好


通过1284次进样之后的结果对比,可见实验峰形保持一致,峰高无和主峰保留时间保持一致;且多次进样后峰面积与进样体积的比例关系良好,R² = 0.9995。


测试条件:

色谱柱:ChromaX® A20

流动相

  • Buffer A: 20mM PB+150mM NaCl,pH 7.2

  • Buffer B: 0.1%HCl +150mM NaCl,pH 1.9

样品:10%猪源血清提取物

流速:1mL/min

进样体积:10µL

检测波长:280nm


图片2.png

图2:1284次进样检测叠图


图片3.png

图3:多次进样后标准曲线


订货信息


微信截图_20260318154145.png

表2:ChromaX® A20产品信息



感谢您对百林科的支持。如果您在抗体浓度测定中遇到任何挑战,或希望了解更多产品细节、申请试用,欢迎随时联系我们。


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